朗道多夫灌注系统
1898年,Oskar Langendorff出版了体外Langendorff灌注至今仍在使用的技术。
由于灌注液是为了模拟血液的性质而设计的,因此其成分极其重要。理想情况下,灌注液应具有缓冲能力(7.4 pH值)、能量来源、肿瘤压力能力、载氧能力,同时保持在生理温度(37℃)。
那么你们可以使用哪些灌注系统呢?
媚兰博士白,悉尼大学心血管研究员和病理学讲师分享了她在Langendorff心脏实验中选择正确灌注系统的专业知识,无论是晶体、全血还是红细胞。
晶体灌注
当我们谈论晶体灌注时,我们主要指的是Krebs-Henseleit Buffer (KHB)。它是应用最广泛的与Langendorff灌注相关的灌注缓冲液。
KHB含有类似于血浆含量的离子,如氯化钠、硫酸镁、磷酸钾、碳酸氢钠和氯化钙。重要的是,缓冲液中不仅要有95%的氧气,还要有一些二氧化碳,以保持生理pH值为7.4。
在制定实验方案时,考虑这些离子的生理水平是很重要的,因为KHB的大部分成分实际上将处于超生理学水平(高于正常的体内发现的水平)。
灌注液还必须为心脏代谢提供外源性碳源——最常见的选择是葡萄糖。丙酮酸和游离脂肪酸也可以用作碳源,但是,你可能会遇到一些溶解性和起泡的问题。
最后,考虑到KHB是一个无蛋白系统,瘤压显著低于生理水平,增加了组织的总含水量,有效地模拟了一个流行病的情况。系统所需的超aphysiological flow rate进一步加剧了这种情况。在没有血红蛋白的情况下,血管床的载氧能力也会相对下降。
即使考虑到这些假定的限制,晶体灌注系统仍然很受欢迎,主要是因为相关的低成本和生产缓冲系统的可重复性。
全血灌流
全血灌注系统的优点是能够维持与生理环境几乎相同的环境。然而,与晶体灌注系统相比,它的设置具有更大的挑战性。
这个系统的主要缺点是它最初无法在从体外冠状循环。为了避免这样的问题,可以用捐赠的动物来为血液重新充氧。然而,这种再循环也意味着血液必须经过内联过滤,这可能会带来额外的问题。
全血灌注系统的流速明显低于晶体,然而,存在溶血或血细胞分解的显著风险,并且供体动物的体液效应可能对其产生影响体外的心。
相反,当我们考虑从体外心脏可能含有污染物,这可能会对供体动物产生影响,这些都是在制定实验方案时需要考虑的因素。
红细胞灌注
红细胞灌注使用混合的牛来源的红细胞和白蛋白,以及水晶缓冲液,如KHB。
这导致灌注系统(如全血灌注)能够维持生理渗透压和肿瘤压力。
受红细胞灌注影响的心脏倾向于在较长时间内保持生理灌注率。然而,这个系统的成本又增加了这是一个非常费力的过程来进行灌注。
希望这个总结能帮助你决定哪种灌注最适合你孤立的Langendorff心脏系统.想了解更多关于Langendorff灌注技术的信息,请查看Melanie White医生的建立孤立Langendorff心脏制剂的最佳实践和关键考虑。
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