首先，必须用两种手术方法中的一种将心脏从动物的胸腔中取出:
- 中位数胸骨术：沿着胸骨制成的切口，之后胸骨本身被分开（或“破裂”）以暴露心脏;或
- 双侧胸骨切开术:在胸骨两侧开两个切口，露出胸腔。
成功提取后，心脏被浸泡在冰冷或半冰冻的溶液中。
然后用以下两种方法中的一种插管心脏:
- 垂直法:当心脏被维持在冰床上时，主动脉被识别出来。然后在不使用显微镜的情况下迅速插管。然后将主动脉夹在套管上进行支撑，然后用缝线将其打结。建议研究人员近距离放置一个装有半冰冻溶液的容器，以便在插管过程中保持心脏。
- 水平方法:从灌注系统中分离出套管(以前使用三通水龙头填充灌注液)，并连接到微型定位器上。然后使用微型定位器在心脏上方水平移动套管。主动脉在显微镜下被识别，然后躺在冰床上插管。在主动脉插管后，心脏和导管被重新连接到灌注系统。必须注意确保没有气泡进入灌注系统。
