Langendorff Retorgrade心脏灌注|最佳实践|AdinStruments.

经过梅尔·纳丝带

这孤立Langendorff心一直是一个多世纪的心血管研究的基石。其长期的科学相关部分是部分原因是它允许在混淆激素和神经系统影响之外研究实验条件。此外，孤立的灌注心脏用作桥梁体内和在体外在心脏生理学和药理学上有许多应用的研究。

研究员，Melanie White博士悉尼的大学，定期在她的研究中申请Langendorff技术;研究心脏在面对心肌缺血等重大生理挑战时如何表现。

我们在使用Langendorff技术方面时，我们将Melanie Ser询问她的专业知识。在这里，Melanie将讨论在切除，插管和灌注心脏时的最佳实践和关键考虑因素，以及用于定义排除标准和监控功能输出的方便提示。

（警告 - 视频包含大鼠模型的解剖素材）

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重要的注意事项

供体动物

在设计Langendorf实验时，一个重要的考虑是你将使用什么物种作为供体。由于其经济可行性，大多数研究都是使用小型啮齿动物模型(主要是小鼠和大鼠)进行的。

更大的啮齿动物和小的哺乳动物，如豚鼠和兔子也是一个受欢迎的选择，因为它们的脉管系统比老鼠或大鼠大得多，使插管步骤更容易。然而，请记住，大型动物通常更昂贵的住房和有不同的处理要求。

动物的性别和年龄也会影响你的实验，这取决于你问的问题。例如，女性可能有更小的梗死区域，这可能是一个问题，如果你使用的是缺血-再灌注模型。

麻醉的选择

选择适当的麻醉剂很重要。使用的两个主要麻醉组是吸入剂和注射剂，后者通过腹膜内或静脉输出方式给药。

通常，我们使用巴比妥酸盐（例如戊巴比妥），在该领域相当常见。但是，重要的是要注意巴布妥酸盐的治疗范围狭窄，以施加足够深的镇静，但避免心肺抑制。我们还应用肝素（抗凝血剂）以减少血液供应的凝血。这可以在镇静期间用麻醉递送，或者可以单独应用。

心脏切除

在对动物进行任何手术之前，一定要确保麻醉深度足够深。你可以通过检查动物脚垫上的听觉反应和疼痛反射来做到这一点。

为了删除心脏，您需要进行胸廓切开术以暴露心脏和伟大的船只。在切除程序期间，将顶部的主动脉描述在根本之上，但在主动脉弓下方的过程中很重要。这将为您提供足够量的主动脉来灌注主动脉鼻窦反过来，左右冠状动脉循环。

一旦切除，心脏立即被浸没在寒冷的心脏病溶液中，以限制在切除期间发生的缺氧期的影响。我们试图将我们的时间从膜片的开口最小化到悬挂的心脏到大约90秒，但在一个伸展时，我们会去120秒钟。

插管

到目前为止，心脏插管是手术中最具挑战性的一步，最终取决于动物的大小。一般来说，动物的体型越大，就越容易进行主动脉插管。一旦心脏牢固地结扎在导管上(但至少要缝合两次或两次以上)，您可以逐渐将大约2ml / min的流量从大鼠模型中提高到13至15mL / min，允许灌注开始。在这里查看兰多夫灌注类型的信息。

这时，你就可以从心脏切除任何多余的组织了。这将有助于避免不必要的力量，将心脏拖下主动脉，并产生额外的压力。